Overblog Suivre ce blog
Editer l'article Administration Créer mon blog

Présentation

  • : taysir assistance
  • taysir assistance
  • : medicalised transport,medical assistance, plastic surgery
  • Contact

STOP II

Rechercher

         187882 146207682119751 1124221 n

شكرا للزيارتكم

29 septembre 2010 3 29 /09 /septembre /2010 12:54

 

التشخيص الفطري للكانديدوز
 

 


 

I.      التمهيد:

كانديدوز أعراض مرضية كثيرة الإنتشار متسبّبة بإصابة بغمائر من صنف كانديدا.

 1.    التعريف :

 2.    العنصر المتسبّب:

فطريات طبقة الدويّروميسات من عائلة الكريبتوكوكاسبي، صنف كانديدا.

كانديدا ألبيكانس. الأبيض الاكثر أهميّة

ك –تروبيكاليس، ك بسودوتروبيكايس، ك كروزي، ك باراكروزي ، ك غيلارموندي.

 3.    الوبائية:

يتواجد بصفة عادية في الأنبوب الهضمي عند الإنسان ثمّ يمكن أن يجتاح الجسم.

عدوى خارجية.

إن الدور المرضي للكانديدا يتعلّق بحالة العائل.

 4.    العوامل المسهّلة لإجتياح الجسم بالكانديدا.

تدهور الحالة الصّحية.

إضطراب هورموني ( سكّري، مرأة حامل).

أسباب دوائية أو جراحيّة.

سن: أطفال أو شيوخ.

عوامل موضوعيّة.

5.    العلامات السّريرية.

علامات ممرضة مباشرة فوق الأنسجة مكان تكاثر الطفيل.

علامات ممرضة غير مباشرة مناعيّة: حساسيّة.

 

 كانديديوز سطحية:

أضرار جلديّة غير خطيرة بين أصابع الأرجل، أضرار تحت الظفر.

أضرار جلديّة مخاطيّة فمويّة حنجريّة، تناسلية، بوليّة، جرجيّة

 

 كانديدوز ميعاويّة:

هضميّة.

قصبيّة رئويّة.

بوليّة، عضل القلب.

إجتياح الدورة الدّموية.

 

التشخيص البيولوجي.

بالنسبة للكنديدوز السّطحية، يجب إيقامة تشخيص أفطوري.

بالنسبة للكنديدوز العميقة يجب إقامة التشخيص المناعي مع التشخيص الأفطوري إذا أمكن.

 II.   التشخيص الأفطوري للكانديدا.

 

يعتمد التشخيص على:

البحث عن العناصر الأفطورية للإضرار بالإستعمال النشخيصي المباشر للأخيذة.

عزل الأفطور وتشخيص الفصيلة.

يكون التشخيص صعبا ، لأنّ كثير من الخمائر من صنف كانديدا تكون موجودة بصفة عاديّة.

يتفرّد الكانديدا الأبيض بإمكانية وضع تشخيص الفطوري بالكشف عن الكلاميدوسبور.

كما يصعب أن نكشف عن سبب الأفطور في المرضيّة

1.    الخزع:

‌أ.     إحتياطات عامّة

إنجاز جميع عمليّات الخزع والحمل إلى المخبر في وسط معقّم معزول عن الجراثيم.

يجب أخذ كميّة كافية عند فحص الجلد يجب إجتناب جميع الأدوية المتسبّبة في إخفاء الفطر كمضادات الفطور، الأدوية المعقّمة، مضادات الحيوية.

عند فحص البراز يجب إجتناب جميع الأدوية المحتوية على الخمائر.

 ‌ب.الكنديدوز الجلديّة أو الجلد مخاطية.

إستعمال خرشات ماسحة معقّمة مبلّلة فقط.

الأظافر: أخذ عيّنة مقصوصة بالمقص.

شفطات الأضرار الجلديّة الجافّة تقشر الشفّطات بمسحاة بروك بمبضع أو بملقح.

أخذ القيح، والمصالة في الاضرار الجلديّة بممصّة باستور.

مسبار معدي أو معوي:

الكنديدوز المعوية أو المرّارة.

الدّم أو السّائل الدّماغي الشوكي أخذ ذلك بصفة معقّم بالطرق الشائعة.

القصبة والرّئة: إستعمال مسبار قصبي.

الشرج: فرشات ماسحة معقّمة.

الأخيذات المعويّة: أنبوب معقّم.

2.    الفحص المباشر:

‌أ.            الإحضارات:

 الفحص المبلّل:

قيح، مصالة، إفرازات مخاطيّة تنبيب المعدي، بول، س ن ش.

إنجاز الفحص مباشرة في الحالة النضرة بدون تلوين بين صفيحة وساترة.

زيادة قطرة ماء مالح 3.

زيادة قطرة ماء مالح مصحوبة بقطرة من اللّغول.

فحص شريحة جافّة بعد تلوين غرام

ماي غينوالل جيمسا.  

جيمسا  أزرق زياهل.

الأخيذة الجلديّة الجافّة:

الشفطات، الأظافر، الزغب،

يجب الإضاءة ب  50h 40 . %.NaoH 10 – 20 %.لا كتونينول.

تؤخذ شريحة توضع فوقها قطرة من الكاشف الموضيئ.

تترك بعض الوقت لتفاعل الكاشف ويمكن تنشيط االتفاعل برفع درجة الحرارة.

يفخص الأخيذة بين شريحة وساترة.

 

الأخيذة التشريحية.

تثبيت وتلوين بعدّة طرق.

يجب أخذ أخيذتين، الأولى للتلوين والثانية للزرع.

 ‌ب.        الهيأة المجهرية:

خميرة برعميّة مع ظهور شبه خيوط.

خليّة صغيرة معزولة 2 – 4 مل مستطيلة مبرعمة في بعض الأحيان غشاء رقيق يكون مصحوبا أو غير مصحوبا بخيط أفطورية.

يتكوّن الخيوط الأفطورية بعناصر مختلفة الطول ولها أطراف مستديرة ( قطب 3 – 5 مل).

توجد في نقط إلتحام الخيوط عناصر برعميّة: بلاستوسبور.

تاخذ هذه العناصر الفطرة بصفة جيّدة التلوين ( غرام اللّغول، الأزرق، الجيمسا). تتلوّن بأحمر بنفسجي، بملوّن HMM .

لا يتمّ التشخيص لإلاّ بعد الزرع.

 التشخيص التفاضلي:

سكاروميساس: هيأة شبيهة جدّا بدون خيوط.

الجيوتريكوم : خمائر ذات هيأة مستطيلة لها خيوط أفطورية مقسّمة، خلايا مستطيلة 4 – 8 µ ذات أطراف مستديرة.

 

توجد بصفة طبيعية في الفهوة الفمّية في التنخيمة وفي البراز.

الكريبتوكوكوس2 خميرة ذات كبسولة خميرة مستديرة مبرعمة من قطب واحد في أغلب الأحيان غير لاصف.

تكشف الكبسولة بالحبر الصيني.

الرّشاشات:

يمكن أن تقترن الخيوط الأفطورية ببويضات مستديرة 2 – 3µ خضراء رماديّة بدون تبرعم.

الأكتينوميسات نوكورديا 1 µ محبّبة.

الفطوريات الجلديّة :

خييط نضامي منقسم في أغلب الأحيان إلى أرتروسبور ( مظهر سلاسل بوخميّة).

من الناحية العمليّة يكشف التشخيص المباشر عن وجود أو عدم وجود خمائر وإن عدم رؤية الخمائر في التشخيص المباشر لا تنفي مواصلة الزّرع والتشخيص المستقبلي.

3.    الزرع والفصل

‌أ.            الاوساط الجيلوجيّة الصلبة

سابورو العادي.

سابورو + مضادات حيويّة ( نيوميسين ، بينيسيلين...)

سابورو + مضادات فطريّة (الأكتيديون).

 تزرع بصفة نظاميّة زراعيّة إبداء من الاخيذة في أنبوبين من كل وسط وتوضع كل واحدة منها في درجة حرارة 25 و 30 درجة من 24 إلى 30 ساعة ويجب الزرع بصفة وافرة.

 في الأنبوب : خطوط متلاحمة بعروة بلاثين.

في العلبة : بالطريقة الطفويّة ( ش ن ش ، البول، البراز)

 ‌ب.        الأوساط السائلة:

مستحضر لزراعة عادي.

سابورو سائل غير جيلوزي ( عادي، سابورو مع مضاد حيوي، سابورو مع مضاد للفطريات).

وسط كاستانيدا: وسط سائل وصلب يستعمل لزرع الدّم.

تكون الزراعة ممكنة في 48 ساعة ولكن إذا كانت صلبية يمكن الإحتفاظ بها حتى مدّة أسبوع.

التشتيل : غعادة زرع مستعمرة واحدة فوق وسط PCBأو جال سابورو، أو إستعمال وسط إنتقائي ( رولان باها 3- 4 ) يزيل نبات البكتيريا

4.    المماثلة

يمكن مماثلة فصيلة الكانديدا بعد زرع وسط جيلوزي

يتمّ تشخيص الكانديدا ألبيكانس بفحصين إثنين

تكوين الخيطيات في المصل:

      فحص ذات خصوصية بالنسبة لكنديدا ألبيكانس مماثلة ممكنة بعد 24 ساعة تتمّ  بقدرة الكانديدا الأبيض لتكوين خيطيات عديدية إذا وجد في مصل الإنسان.

كلاميدوسبور في وسط أرز أغار توين ( أ أ ت ) في 24 إلى 48 ساعة.

      إذا كانت نتيجة هذين الفحصين سلبية يجب مواصلة التشخيص ( زيموغرام   أكسانوغرام).

      النيين يمكّنان من تشخيص الفصيلة بين 48 و 72 ساعة ويمكن إقامة جدول   المضادات الفطرية على حدة.

 ‌أ.    مماثلة الفصيلة كانديدا.

يجب البحث عن

إنعدام التبوّغ (......)

تكوين شبه مشيجي ( بلاستوسبور).

 

 إنعدام التبوّغ  (......)

زرع أرومة (......) فوق وسط كرودكووا أو وسط جبس.

يحتفظ بالزراعة مدّة 10 إلى 15 يوم في 25 درجة.

     

شريحة جافّة

يلاحظ وجود زق (......) (خليّة تشكل كيسا تنشأ فيه الأبواغ) تبرز بملوّن كوفرات.

تتكوّن عند السّاكاروميساس ( الخميرة العاديّة) وتكون منعدمة عند الكانديدا.

 

تقنية التلوين

تغطي اللّطائخ بملوّن زياهل.

يسخّن حتى الغليان

تترك الشريحة حتى تجفّف.

تغسل بالماء العادي.

يزرع الماء بالكحول وحمض الأسيتيك 2 % يحصل على لون وردي فاتح.

يغسل.

تغطي الشريحة بمحلول مائي 1 % من أزرق المتيلان

يجفّف

يفحص في التكبير × 100 تظهر الخمائر والزّقاء أزرق فاتح. وتظهر أبواغ الزق حمراء.

 

 البحث عن الميساليوم أو شبه الميساليوم وعن البلاستوسبوم.

وسط فقير متعدّدة السّكريات تتمّ الزراعة في وسط لا هوائي.

وسط جيلوزي PCB في أنبوب.

تخطيط عميق.

تودع 24 – 42 ساعة في 25 درجة.

تفحص بين شريحة وساترة

مشيح: صنف كانديدا.

كلاميدوسبور : كانديدا ألبيكانس.

جيلوز دقيق القطانية + توين 80

جيلوز دقيق الارز مع توين 80 (RAT ).

علبة على السّطح.

16 – 18 ساعة 25 درجة.

مراقبة العلبة تحت المجهر

لا تمكّن من تفريق الكانديدا من السّكاروميساس

الكنديدا: خييط مع بلاستوسبور

السّكاروميساس: خييط مع زق (أسكوسبور).

 ‌ب.        مماثلة صنف كانديدا ألبيكانس.

 البحث عن الكلاميدوسبور

خاص بالكانديدا ألبيكانس

الكلاميدوسبور ك هي خليّة كبيرة كرويّة، غشاء مزدوج حدود واضح ، شديدة الإنعكاسية. قطب من 7 إلى 10 سم سهلة الرّؤية في مجهر متناقض الأطوار

يبدو أنّ سبب وجود هذه الكلاميدوسبور هو المقاومة في الأوساط الفقيرة

تنبت هذه الأكياس في طرفالخييط وتسبق بخليّة مميّزة

البروتوكلاميدوسبور

 

 

الزرع : وسط لاهوائي غني بالغاز الكربوني

وسط فقيرن درجة حرارية ضعيفة بحضور شاطئ فعّال (صابون ).

وسط PCB ، RAT خط عميق 24 إلى 48 ساعة.

 

البخث : يبحث عن الكلاميدوسبور بأخذ عيّنة جيلوزيّة في عمق الخط ، توضع بين شريعة وساترة.

75 % أرومت كانديدا ألبيكانس كلاميدوسبور في الزرعة الأولى للPCB.

90 – 95 % في الزرعة الثانية.

 

 البحث عن تكوين خيّيط في المصل:

يختصّ الكنديدا ألبيكانس بتكوين خيوط مشيّجة بسرعة في المصل (كذلك بالنسبة لكنديدا ستلاتويدا).

من 0.5 مل مصل يضاف إليه بضع قطرات من معلّق فبيري.

 يوضع في المرفأة 37 درجة مدّة 4 ساعات.

يسهّل الفحص بإنعدام الأوكسيجين ووجود الغاز الكربوني.

‌ج.         مماثلة الاصناف الأخرى للكنديدا.

 

الزيمو غرام:

فحص تخمير السّكر.

يبحث عن الإغارة على السّكر في وسط لاهوائي.

أنواع السّكر المستعملة الغلوكوز، اللّكتوز، المالطوز، السّكاروز، الرّاتينوز.

أحكام التخمير:

إذا كان الغلوكوز سلبي: فإنّ جميع أصناف السّكر الأخرى سلبية.

إذا كان الغلوكوز إيجابي ( لفولوز والمانوز دائما إيجابي) امّا ( مالتوز واللّكتوز دائما سلبي => غالاكتوز متغيّر.

تستعمل إمّا الطريقة ذات الحجم الكبير تستهلك أكثر كواشف أو تقنية ذات الحجم الصّغير وهي الأكثر إستعمالا.

 III.   التشخيص المناعي:

المستضدات

1.    مستضدّات ذائبة:

مستضدّات خلوية ومستضدّات إستقلابية.

إحضار المستضد الخلوي

إستعمال الأرومة ( أ. آلبيكان تصنيف دموي A مدعّمة بإحتواء تصنيف دموي B وليس العكس).

زرع كروي (L5) محتوى سوبورو سائل (L3) 48 ساعة في 37 درجة C، تحت تهيّج (خضخضة).

زرع الخمائر المغسولة بماء مقطّر (3 مرّات).

رسب مع ماء مقطّر (بأجزاء متساوية)، مسحوق آلي أو لإستخراج المستضدّات سيتوبلاسميك.

تنبيذ ثلجيّ ( 10 إلى 15000%) ثمّ التجفيف.

إحضار المستضد الإستقلابي

وسط زرع مميّز ثمّ التخفيف

تصفية المستضدات الخلويّة:

      للحصول على مستضدات سيتوبلاسميك ذات صبغة هيوليناتية التفريق على عمود  مسطّح(أ) الذي يحفظ les mannanes.

المعايير ( توحيد القياس).

ركس البروتنات:المراقبة المناعة بأمصال الأرنب

                                                      المستضدات المقطّعة

إحضار (EX ) .

زرع لـ C. Alucans على سابورو صلب مدّة 24 ساعة أو 48 ساعة.

غسل 4 مرّات في ماء فيزيولوجي مالح ( تنبيذ مدّة 5 دقائق20%).

غسل مرّة واحدة في ماء مقطّر 1.000000 خميرة في ميللتر

وضع ثفل المعلّق على الشّريحة.

التجفيف في 37 درجة تحت التهوئة.

التثبيت بمجرى ثلاثة مرّات في لهيب

‌أ.            الإستعمال أو الإحتفاظ في 20 درجة .

مثلة أخرى

زراعة :

مطهّر: بـ 5% خلال 30 دقيقة.

غسل:

التخفيف، ثفل، تجفيف، حفظ (  ).

لحظات الإستعمال، تثبيت في آسيتون مدّة 10 دقائق.

 ‌ب.        تفاعلات المستضدات الذّائبة:

Immunodiffusion d’OUCHTERLONY

المبدأ : ( 3 كريات حمر)، عناصر التفاعل:

القيمة : طويلة (8 أيّام)، كثيرة الإستهلاك للمستضد والمصل المركّز 3 مرّاتن حاليا يقع التعويض بـ ES.

 

هام جدّا : تقنية التغيّر التدريجي.

المبدأ: ( صورة) عناصر التفاعل، بروتوكول.

القيمة: تحليلية، طويلة، (8 أيّام)، كثيرة الإستهلاك للمستضد والمصل(S).

 

مثلا:  المستضد = 100 ملقرام / مللتر ( ماء مقطّر)، في 25 / ملقرام

المصل   = 200 µ/ لتر

    إليكتروفوراز Eléctrophorese.ج 

المبدأ: agarose، حاليا acetate du cellulose.

عناصر التفاعل:

قيمة المنهجيّة: السرعة، ضعيفة الإستهلاك للمستضد والمصل.

مثلا: المستضد = 0.5 ملقرام في 1 مللتر ماء مقطر.

المصل  = 15 µ

 الشرح:

تواجد قوس = تلوّث (عدوى) بـ C.Albicanis.

كانديدوز سطحي ميكوكوتاني ( Mucocutannée ): غياب القوس أو قوس واحد متفرّق متّصل بـ Mannanes.

كانديدوز مزمن Mucocutanées محبّب، كانديدوز عميق:

عدد هام من الأقواس : ظهور أقواس بعد أسبوع من تعفّن الدّم مع إرتفاع الحرارة.

مستضدّات خلويّة غنيّة بالبروتيين هامّة لرفع كانديدوز الباطنيّة (العميقة).

المستضدّات الإستقلابية غنيّة بالمانانات Mannanes.

سترفع لاحقا الكانديدوزات الجلدّية (السّطحية).

الجمع بين الإثنين ضروري.

أهمّية متابعة تطوّر المستضدّات التّرسّبية (زيادة عدد الأقواس المرضية بوضوح = مميّزات متطوّرة للعدوى).

‌د.           Immunoélectrophorèses bidémensionnelle

المبدأ، عناصر التفاعل:

القيمة : أهمّية علميّة أكثر من التشخيصيّة٬ منهجيّة نوعيّة وكمّية.

بهذه المنهجيّة، الدّراسة المختلفة لمجموعة من المواضيع تظهر.

+ 0 إلى 5 أقواس = كانديدوز جلدي ( سطحي).

+ 2 إلى 12 قوس = تعفّنات دمويّة.

+ 5 إلى 20 قوس = كانديدوز باطنيّة.

+ 0 إلى 5 أقواس مواضيع عاديّة.

ELIDA  ( المستشهد بها) المذكورة.

HAP ( المستعملة حاليّا).

‌ه.        المرشّح الإختباري المسوّق من طرف Roche.

المبدأ

عناصر التفاعل : مستضد ذو طبيعة Polysaccharidiqueمستخرج لـ (C. Albicans) نوعيّة الدّم ( أ) بالفينول.

GR خروف حامل للمستضد مطهّر مجفّف (Formollésetlyophilisés)

القيمة : حساسيّة ( بالأخص لـ IgM )، إنتاجية جيّدة، سرعة الإنفاذ، إختبار بـ 2MEللبحث عن IgM مطبّقة.

الشرح

Partager cet article

Repost 0

commentaires